Efecto de anticuerpos policlonales anti-proteínas de membrana externa, en la adherencia al vidrio de Escherichia coli extraintestinal aviar.

Yolanda Almanza Márquez, Aída Huerta García, Margarita Almanza Márquez, Rosa María Ramírez Santoyo. Universidad Autónoma de Zacatecas: Centro de Biología Experimental, Calzada de la Revolución Mexicana s/n, Guadalupe, Zacatecas, C. P. 98600, A. P. 12. Tel. y Fax: (492) 921-13-26. Facultad de Ingeniería, Av. López Velarde No. 1, Zacatecas, Zac. E-mails: yalmanza@cantera.reduaz.mx y romaras@cantera.reduaz.mx

Introducción: Los principales síndromes que causa E. coli patógena aviar (ECPA) son el respiratorio y el septicémico, los cuales se presentan principalmente en pollo de engorda, generando grandes pérdidas económicas en la industria avícola. ECPA sintetiza una variedad de adhesinas de tipo fimbrial que participan en la patogenicidad, sin embargo, la participación de adhesinas afimbriales no se descarta. En estudios previos encontramos una cepa ECPA que tiene la capacidad de adherirse al vidrio, cuando se inocula en medio RPMI, con 10 % de SFB, o en caldo infusión cerebro corazón , y se incuba con 5 % de CO2 a 41°C. El objetivo de este estudio fue investigar el efecto de anticuerpos policlonales anti-OMP de esta cepa adherente, en la adherencia al vidrio.

Metodología: Se extrajeron OMP de una cepa adherente y otra no adherente de ECPA. Con las OMP de la cepa adherente. Se inmunizaron conejos N. Zelanda. El suero hiperinmune se descomplementó, se adsorbió con las OMP de la cepa no adherente y con una cepa positiva a fimbria tipo 1. Se hicieron PAGE-SDS y Western blot, con las OMP de las dos cepas de ECPA. Para los ensayos de adherencia un inóculo de 107 UFC/ml de la cepa ECPA adherente, previamente crecida a la mitad de la fase de crecimiento log y lavada dos veces con PBS, se mezcló con el antisuero policlonal anti-OMP y se transfirieron dos ml. a viales de cintilación que contenían un cubreobjetos, se incubaron 90 min. a 41°C, con 5% de CO2. Se hicieron lavados con una bomba de vacío. Los cubreobjetos se fijaron y tiñeron con Giemsa. Se contaron 10 campos. El efecto del antisuero se midió comparando la adherencia de la misma cepa sin el tratamiento con anticuerpos. Con la prueba de Duncan se midió la significancia de los resultados.

Resultados y discusión: Se observaron diferentes patrones electroforéticos del PAGE-SDS y del Western blot, entre las OMP de la cepa adherente y la no adherente. Hubo una disminución significativa (alfa 0.05) en la capacidad de adherirse al vidrio de la cepa tratada con anticuerpos policlonales, en comparación con la cepa no tratada. Nuestros resultados sugieren que las OMP de ésta cepa adherente ECPA, pueden participar en la adherencia, evento clave para la supervivencia bacteriana dentro y fuera del huésped, y corrobora la naturaleza multifactorial de la colisepticemia aviar.

Conclusiones: El antisuero policlonal anti-OMP, inhibió la capacidad de adherencia al vidrio.

Financiamiento: CONACYT 3788-M.

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