Yolanda Almanza Márquez, José López Alvarez y Jorge Pérez Martínez. Departamento de Bacteriología. F.M.V.Z.

Con el objetivo de estudiar la interacción de E. coli portadora del plásmido ColV con macrófagos de pollo. Se compararon cepas septicémicas ColV+ y ColV- de un aislamiento de E. coli de origen aviar, una cepa YA21 y de una cepa del laboratorio (cepa K12). Macrófagos peritoneales de pollo fueron inducidos con caldo tioglicolato y cosechados después de 24 o 40 horas mediante lavado de la cavidad peritoneal con solución balanceada de sales de Hank adicionada con heparina y antibióticos. Los macrófagos fueron cultivados con medio RPMI en viales de cintilación que contenia un cubreobjetos en el fondo y se incubaron a 41°C en atmósfera de 5 de CO2 durante 3 hrs. Una vez adheridos los macrófagos, éstos fueron inoculados por cuadruplicado con una multiplicidad de infección de 20 bacterias por macrófago con cada una de las bacterias a probar, y se incubaron durante 90 min. Dos de los objetos inoculados con cada una de las bacterias fueron teñidas con Giemsa a fin de determinar el número de bacterias asociadas (adherentes y/o ingeridas) por macrófago. El resto de los viales fueron utilizados para determinar el número de bacterias viables presentes en el medio de cultivo (extracelulares) y el número de bacterias obtenidas después de lisar a los macrófagos con una solución de NP40 (intracelulares). La cepa silvestre portadora del plásmido ColV (YA21 -ColV+) fue aparentemente fagócita y con menor eficiencia que su isogénica Col V-, a juzgar por el mayor número de bacterias viables extracelulares y por el mayor número de bacterias que permanecieron asociadas a los macrófagos después de los 90 min. de incubación. Sin embargo, la cepa YA21-Col V+ no mostró mayor resistencia intracelular de acuerdo a las cuentas viables obtenidas de los lisados de macrófagos. Por el contrario, no hubo diferencias significativas interacción bacteria macrófago con las cepas isogénicas de E. coli K12. Estos resultados sugieren que además del plásmido ColV son necesarios otros factores. probablemente presentes en la cepa silvestre y no en la cepa K12. para interferir con el proceso de fagocitosis.

Atrás